ルシフェラーゼはATP量に依存して発光するため、光の強さを測ることで迅速かつ高感度にATP量を測定できます（図1）。当社では、1980年代にルシフェラーゼの研究に着手し、ゲンジボタルとヘイケボタルのルシフェラーゼを「スリーパーベクター」により大量生産することに成功しました。また、野生型のルシフェラーゼは熱や化学物質に対して不安定でしたが、臨床診断用酵素開発で培った酵素改良技術を用い、熱や界面活性剤に対して安定なルシフェラーゼの開発に成功しました（図2、3）。現在、これら改良型ルシフェラーゼを用いた製品開発が進んでいます。

50℃での残存活性を比較した。30分の処理で野生型の残存活性は数％であったのに対し、LlL-217Leu変異体は90％以上の残存活性を示した。

0.1％塩化ベンザルコニウム存在下で、発光の経時変化を測定した。界面活性剤耐性変異体は、安定な発光を示した。

微生物や食品残渣などの汚れにはATPが存在しているため、ルシフェラーゼを用いれば汚れの量を迅速に測定できます。
しかし、発光の過程でATPはエネルギーを失ってAMP（アデノシン一リン酸）となるため、反応に伴い発光が弱くなってしまいます。そこで、AMPをATPに再生する酵素の探索を行い、PPDK（ピルビン酸リン酸ジキナーゼ）と呼ばれる酵素を見出しました。PPDKとルシフェラーゼを組み合わせ、ATPをサイクリングするシステムの構築にも成功し、従来よりも高い発光を安定に持続できるようになりました（図4）。この技術の応用により、従来よりも小型で安価な測定機でも光を検出できるようになり、食品製造工場、給食調理施設、保健所などを含め、使用するフィールドが広がりました。
また、ATPは酵素や加熱や長期間の保存などの影響でも、ADP（アデノシン二リン酸）、さらにはAMP（アデノシン一リン酸）に分解されてしまいます。そこで、ルシフェラーゼにPPDKとPK（ピルビン酸キナーゼ）を組み合わせ、ATPだけでなくADP、AMPも同時に測定できる方法を開発しました（図5）^3）。これらの技術を応用したATP+ADP+AMPふき取り検査法（A3法）（図６）は、より幅広い汚れを検出できる方法として、さらにフィールドを広げています。

ATP法によって微生物量を測定するためには、汚れなどに含まれるATPを前処理によって分解し、微生物内に存在するATPだけをルシフェラーゼと反応させる必要があります。当社では、微生物の外に存在するATPを、2種類の酵素を組み合わせて効率的に分解する方法を開発しました。この前処理法と、独自の微生物ATPの抽出法を組み合わせ、30分程度の操作で微生物を測定できる方法を開発しました（図7）^4）。

ところで、この方法を様々な飲料や食品に適用すると、食品由来のATPが十分に分解できず、バックグラウンドが高くなることがわかりました。そこで、前述の酵素と界面活性剤を組み合わせた前処理法を開発し、現在では乳製品や果汁、缶飲料、PETボトル飲料などの微生物検査が可能となっています（図8）。